İmmünofiksasyon
İmmünfiksasyon vurgulamak ve sesli olarak açıklamak için immünolojik bir tekniktir monoklonal immünoglobulin olarak serum veya idrar , bir hastanın. Şu anda immünoelektroforezin yerini alma eğilimindedir . Miyelom gibi belirli hemopatilerin tanı ve değerlendirilmesi için büyük ilgi görmektedir.
Prensip
Çökeltme yoluyla tespit için bir yöntemdir, yani çözünür immünoglobulin karşılık gelen antikor ile temas ettirildiğinde, çıplak gözle veya bir cihazla görülebilen bir çökelme olgusu meydana gelir.
İmmünofiksasyon, monoklonal immünoglobulinlerin bir karışım içinde elektroforetik hareketliliklerine göre tanımlanmasını mümkün kılar. Bu tanımlamayı sağlamak için, bu immünoglobulinlere özgü antikorlar kullanılır. İmmünofiksasyon, özellikle miyelom veya Waldenström hastalığı gibi hastalıklarda bulunan monoklonal immünoglobulinlerin tespit edilmesini mümkün kılar .
Teknik
Serumun (veya daha önce konsantre edilmiş olan idrarın) bir jel üzerinde biriktirilmesinden oluşur. Proteinlerin boyutlarına göre ayrılmasına izin veren bir elektrik akımının uygulanmasından sonra, jel üzerinde her bir immünoglobulin tipi için spesifik antikorlar biriktirilir. Böylelikle jel üzerinde, çeşitli immünoglobulinlerin bulunduğu seviyede az veya çok dar bantlar belirir.
İmmünoelektroforez gibi immünofiksasyon iki aşamada gerçekleşir:
- İlk adım, her iki teknik için de aynıdır. Serum veya idrarda bulunan immünoglobulinlerin bir jel üzerinde biriktirilmesinden, daha sonra bu immünoglobulinlerin bir elektrik alanı etkisi altında göç etmelerine neden olarak elektroforetik hareketliliklerine göre ayrıştırılmasından oluşur. Bu göç, antijenin kütlesine ve yüküne bağlıdır. İmmünoglobulinler ayrıldıktan sonra bir sonraki adıma geçebiliriz.
- İkinci adım, kullanılan tekniğe bağlıdır. İmmünofiksasyon, test edilen serumun birkaç kez taşınmasını gerektirir. Bunun için anti-immünoglobulinler, elektroforezde olduğu gibi bir kanalda biriktirilmez, ancak her bir göç yoluna ayrı ayrı eklenir. Bir monoklonal immünoglobulinin varlığı, çökelmiş komplekslerin boyanmasından sonra dar bir bandın ortaya çıkmasına neden olur. Örneğin, bir lambda IgG ise, hem anti-G'nin biriktirildiği yolda hem de anti-lambda'nın biriktirildiği yolda dar bir bant gözlemlenecektir.
Faydaları
İmmünofiksasyon, immünoelektroforezin yerini alma eğilimindedir çünkü şu avantajlara sahiptir:
- daha hızlı (üç saatten kısa sürede yanıt süresi);
- biraz daha hassas olduğundan, immünofiksasyon, özellikle küçük miktarlarda (1 gram / litreden az) mevcut olduğunda, elektroforez tarafından fark edilmeyen bir Ig'yi ortaya çıkarabilir;
- kısmen otomatikleştirilebilir ve bu nedenle daha fazla sayıda laboratuvar tarafından erişilebilir;
- okumak ve yorumlamak daha kolay.
Dezavantajları
İmmünofiksasyonun ana dezavantajları şunlardır:
- immünoglobulinler dışındaki serum proteinlerinin araştırılmasını tamamen göz ardı edin;
- immünoelektroforezden daha pahalı olması.
Dış bağlantılar