Corynebacterium difteri

Corynebacterium difteri Corynebacterium
diphtheriae Sınıflandırma

Saltanat	Bakteriler
Şube	Aktinobakteriler
Sipariş	Aktinomiketaller
Aile	Corynebacteriaceae
Tür	Corynebacterium

Türler

Corynebacterium diphtheriae
( Kruse , 1886 ) Lehmann ve Neumann , 1896

Alt sıradaki alt türler

• Corynebacterium diphtheriae bv. tırmandı
• Corynebacterium diphtheriae bv. ara
• Corynebacterium diphtheriae bv. Belfanti
• Corynebacterium diphtheriae bv. mitis

Corynebacterium diphtheriae , 1884 yılında Alman bakteriyolog Edwin Klebs (1834-1913) ve Friedrich Loeffler (1852-1915)tarafındankeşfedildiği için, Klebs-Loeffler basili olarak da adlandırılan, difteri sorumlu patojenik bir bakteridir .

Yunanistan 'da :

• bakteri = çubuk
• coryne = kulüp
• difteri = deri, zar.

Morfolojik karakterler

C. diphtheriae , 1-8 µm uzunluğunda ve 0.3-genişliğinde , kapsüllenmemiş, sporlanmamış, hareketsiz, düz veya eğimli çubuklarla ( basil ) karakterize edilen gram pozitif fakültatif bir anaerobik organizmadır . 0,8 μm , parmaklıklarda ve V harfleriyle düzenlenmiştir. , uçları genellikle şişmiş, genellikle tanecikli renktedir. Çubuklar, kültürde dallı kümeler oluşturur ("Çin harflerine" benzer). İnsanların kesinlikle parazitik bir mikroorganizmasıdır. Difteri belirtilerinden sorumlu olan 62 kDalton'luk protein yapısında bir ekzotoksin üretir . Bu toksinin bir antiserumla ( anatoksin ) inaktivasyonu, difteri aşılamasının temelidir .  

Biyokimyasal karakterler

C. diphtheriae'de pirazinamidaz yoktur. Biovar C. diphtheriae intermedius sadece lipofilik biovar .

• Corynebacterium diphtheriae biovar gravis: nitrat +, glikojen -;
• Corynebacterium diphtheriae biovar belfanti: nitrat -, glikojen -;
• Corynebacterium diphtheriae biovar mitis: nitrat +, glikojen -.

Ekoloji

Hastaların tükürük partikülleri veya mikrop taşıyıcıları ile insandan insana bulaşan bir mikroptur (salgın dönemlerde% 3 ila 5 olabilir). Dış ortamlarda nispeten dayanıklıdır.

Patojenite

Difteri olan psödomembranöz anjin : bu a, pıhtılaşmış serofibrinous sızan alttaki dokulara yapıştırılması. Angina genellikle iki taraflıdır. Başlangıç ​​sinsidir, 2 ila 5 günlük bir inkübasyondan sonra ortaya çıkar. Burun genellikle de enfekte (ancak izole edilen burun difteri nadir ve daha az ciddi). Nadir hala bir difteri olan kulak kanalında veya bir difteri kutanöz yara (özellikle tropikal).

Difteride iki mekanizma ölüme yol açabilir:

• Krup söylemek Psödomembranöz enfeksiyon uzantısı olan larinks , boğulma ile ölüm. Erken sık XX inci  yüzyılın (tüm GP bir gerçekleştirmek için onun kiti donanımı vardı trakeotomi ev), bu komplikasyon bugün nadirdir: Mevcut larenjit obstruents durum ( "krup") yerine nedeniyle birine olan Haemophilus influenza ya da Myxovirus parainfluenza, veya krup veren basil Klebs-Loeffler'ın zayıflatılmış formu veya boğmaca öksürüğünün Bordetella Pertussinum vektörü (referans: Merck Manual Centennial baskısı). Klebs-Loeffler basili olan Corynebacterium diphteriae'nin diğer taksonomisine işaret eden C. haemolyticum psödomembranöz angina vakaları bildirilmiştir ;
• Toksin asıl hedef organları miyokardiyum ve adrenal . İnsanlar için öldürücü doz yaklaşık 0,02  mg'dır .

C. diphtheriae , toksijenik bir bakteridir , bir ekzotoksin salgıladığı nazofarenkste çoğalır. İkincisi, nazofarinkse lokalize olan etkisi ile psödomembranöz difteri anjinasına neden olur . Sahte zar, nazofarenksin tıkanmasına ve boğulma nedeniyle ölüme neden olur . Toksin kan dolaşımına yayıldığında kalbe , böbreklere ve merkezi sinir sistemine ulaşarak felce neden olur .

Epidemiyoloji

Epidemiyoloji, aşılamadan çok açık bir şekilde etkilenir  : Üyelerin en az% 75'inin aşılı olduğu herhangi bir toplumda, difteri nadir hale gelir ve hatta kaybolur. Mortalite (% 5-10) tanı ve tedavinin zamanında yapılmasından etkilenir.

Bakteriyolojik özellikler

Morfoloji

Boyutlar: 3 ila 8 mikron, 0,5 ila 1,0 mikron. Pseudodiphtheria genellikle daha kısadır (artı veya eksi 1 ila 2 mikron) ve tıknazdır; renkleri daha az grenlidir (! Bu farklılıklar yalnızca görecelidir).

Kültür

Gelişme, olağan medyada pek karakteristik değil.

Toksin

• Üreten suştan bağımsız olarak antijenik olarak özdeş protein. Yaklaşık 72 kDa moleküler ağırlığa sahip bir proteindir.
• Bu sentezini inhibe proteinleri inaktif transferaz arasında amino asitler de ribozom memeli hücrelerinin (bakteriyel ribozomlar duyarsızdır). Miyokardiyal ve adrenal hücreler en hassas olanlardır. Buna ek olarak, vakaların% 10, geç felç ( 10 inci için 30 inci  gün), tersine çevrilebilir, genellikle çok ciddi değildir (farenks ve Okülomotor kasları sınırlıdır) gözlemlenebilir .
• Bu toksini üretme yeteneği, bir bakteriyofajın varlığına bağlıdır . Toksijenik olmayan bir suş, "beta faj" adı verilen bu faj tarafından lizojenize edilirse öyle olur.
• In vitro , 100 gama / ml'lik optimum demir konsantrasyonunun üstünde veya altında, toksin üretimi çok azdır veya hiç yoktur. Daha fazla demir varsa, bu proteinin molekülleri onunla birleşerektoksik olmayan sitokrom b'yi oluşturur. Bu nedenle toksin, demir eksikliğinden dolayı sentezi eksik kalan sitokromun bileşimine giren bir protein olacaktır.

Teşhis yöntemleri

Pratik ilgi az serolojik reaksiyon olmadığı için, tanı için üründe basilin keşfine dayanır sürüntü boğaz ve / veya burun nazal mikropların taşıyıcıları için ya da hastalar olan boğaz olduğu içinde sürüntü arama için özellikle önemlidir ( kısmen antiseptik veya antibiyotik pastillerle dezenfekte edilir, ancak bu numuneler tercihen antibiyotik verilmeden önce alınmalıdır. Klebs bacillus -Loeffler tarafından indüklenen difteri ile ilgili olarak, Elek testi şiddetle tavsiye edilir.Tanı: Difteri sistematik olarak bir Yalancı membran anjinası veya bir psödomembranöz subakut cilt ülseri.Difteri tanısı mikrobiyoloji laboratuvarının acil durumlarından birini oluşturur.İzolasyon nazofarengeal örneklerden, membranlardan veya deri örneklerinden alınır.Çoğunlukla polimikrobiyal olan bu örneklerden, şüpheli kolonilerin izolasyonu seçici bir ortam gerektirir. Mikrobiyoloji laboratuvarları tarafından izole edilen difteri kompleksinin tüm korinebakterileri, toksin geninin araştırılması ve türlerin tanımlanması için acilen CNR des Corynebacterérie'ye gönderilmelidir. Difteri şüphesiyle karşılaşıldığında, CNR'ye aynı anda bir sahte membran numunesi gönderilmelidir. Difteri bakteriyolojik doğrulaması için CNR bilgilendirilmeli ve klinik ve epidemiyolojik bilgiler almalıdır - yurtdışında kalma, meslek, aşı durumu, bir veya daha fazla hayvanla temas  vb.  - ilk rapor sırasında toplanır. CNR'ye sevk, herhangi bir klinik difteri şüphesi karşısında acil tedavinin başlamasını geciktirmemelidir.

Yöntemler:

• izolasyon / tanımlama + toksinogenez araştırması (toksin geni + in vitro üretim (Elek)) + antibiyogram;
• Herhangi bir seroterapi öncesinde hastadan serum örnekleri alınmalıdır (serum bankası ve CNR'ye gönderme). Difteri antitoksin antikorunun titresinin belirlenmesi, aşılama durumuna bağlı olarak izole edilen bakterilerin toksini ifade edip etmediğini belirlemeyi mümkün kılabilir.

Tedavi: Toksini olabildiğince çabuk nötralize etmek için, difteri toksini (toks +) kodlayan genin varlığının doğrulanmasından önce bile toksik belirtiler varsa gecikmeden uygulanan seroterapi (ATU nominal kullanımı için Geçici Yetkilendirmeye başvurun).

Antibiyograma göre ayarlanacak antibiyotik tedavisi: Pyostacin ve Erythromycin ile ilişkili ağırlığa göre intramüsküler penisilin G. Tedavi süresi 21 gündür. veya daha az verimli

Yetişkinlerde günde 3  g Amoksisilin üç dozda (oral veya IV), beta-laktamlara alerji durumunda makrolidler. Üç günlük azitromisin dışında 14 günlük tedavi süresi (modaliteler, HCSP 2011 raporu ile bağlantı kurar). Tedaviden sonra olası erken relaps nedeniyle D15 ve D16'da (azitromisin için D7 ve D8) tedavi altındaki boğaz (veya deri) örneklerinin negatifliğini kontrol edin.

Mikroskobik muayene

Difteri açısından etkisiz olsa da , Vincent'ın fuso-spiriler ilişkisinin olası varlığını tespit etmek için herhangi bir anjina sürüntüsü ile Gram smear yapmak gereklidir .

Kültür

Tüm sürüntü anjinası , Streptococcus beta-hemolitik tespiti için bir kanlı agara ekilecektir. Difteri basilinin tespiti, aşağıdaki 2 medyanın kullanımına dayanmaktadır:

• koagüle serum: 80 ° C'de koagüle edilmiş 3/4 ve 1/4 sığır serum suyu içeren orta Loeffler . Bu besiyeri gerçekten seçici değildir, ancak kornaebakteriler orada diğer mikroplardan çok daha hızlı gelişir (12 ila 18 saat) ve dahası, Difteri basilinin morfolojisi en tipik olanı pıhtılaşmış serumdan yapılan müstahzarlarda bulunur. Bu nedenle, "şüpheli" mikrop izole edilmeli ve birkaç gün süren psödodifteriden ayırt edilmelidir; 
• daha seçici ancak daha yavaş olan (36 ila 48 saat) tellürit (% 0,02²) ile desteklenmiş kan ortamı . Difteri basili, suşa bağlı olarak pürüzlü veya pürüzsüz siyah kolonilere (tellürit azalması) yol açar. Ancak psödodifteriler ve stafilokoklar da bu ortamlarda büyüyerek siyah kolonilere yol açabilir: bu nedenle şüpheli koloniler alt kültürlenmeli ve tanımlanmalıdır. Biyokimyasal özelliklere ek olarak, suşun bir toksin üreticisi olup olmadığını belirlemek mümkündür. Bu araştırma in vivo yapılabilir: kobaylarda veya tavşanlarda intradermal aşılama (sızma ve nekroz ) veya kobaylarda deri altı enjeksiyon (öldürücü etki), anti-difteri serumu ile korunan bir kontrol hayvanı. Toksin, Elek yöntemiyle de in vitro olarak ortaya çıkarılabilir  : test edilecek suşların, aşılara dik yerleştirilmiş antitoksin emdirilmiş bir kurutma kağıdı şeridi ile agar üzerinde paralel çizgiler halinde aşılanması: immünodifüzyon ile bir çökeltme hattı oluşturulur. toksijenik suşların antitoksin ile kesişimi.

Aşılama

Önleyici aşılama birçok ülkede zorunludur.

Tedavi

İyileştirici tedavi her şeyden önce antitoksik seroterapiyi içermelidir. Bu, ne kadar erken uygulanırsa o kadar etkili olacaktır. Difteri kaynaklı ölüm oranı

• Serum enjekte edilmesi durumunda% 0 1 st  gün
• Serum enjekte edilmesi durumunda% 4 2 E  gün
• Serum enjekte edilmesi durumunda% 11 3 e  gün
• Serum enjekte edilmesi durumunda% 17 4 inci  günde
• Serum enjekte edilmesi durumunda% 20 5 inci  gün ya da ötesinde.

Antibiyotikler sadece tedavide yardımcı bir rol oynar. Başlıca faydaları, iyileştikten sonra mikrop taşıyıcısı olarak kalan bireylerde mikropların ortadan kalkmasını hızlandırmaktır.

Difteri toksini

Difteri toksini, 3 alt birimden oluşan 58 k Da'lık bir pantropik ekzotoksindir ( hücresel özgüllüğü yoktur ) :

• T zinciri: translokasyon alanı;
• zincir C: katalitik alan;
• R zinciri: hücre reseptör alanı.

Toksinin etki şekli şekil 1'de şematik olarak gösterilmiştir:

1. R alanının zar reseptörüne bağlanması;
2. toksin reseptör kompleksinin içselleştirilmesi ve bir endozom oluşumu;
3. T alanının endozom membranı ile etkileşimi , daha sonra endozomun pH'ının etkisi altında, toksinin translokasyonu ve sitoplazmada C alanının salınması;
4. ADP-ribosilasyon ile hareket ederek C alanının eylemi. Bu bloklar , uzatma faktörü dönüştürür (EF-2) GTP içine GSYİH (hareketi ribozomlar üzerinde haberci RNA EF-2-ADP-ribozom kompleksi üzerine etki ederek).

Notlar:

1. C. pseudotuberculosis ve C.ulcerans ayrıca profilaktik β barındırabilirve toksijenik hale gelebilir;
2. Bazı toksinojenik olmayan C. diphtheriae suşları ( tox-) bademcik iltihabı , septisemi , artrit , endokardit ile komplike olabilen sinüziti belirleyebilir ...

Antibiyotiklere duyarlılık

Bakteriler penisilinler , ampisilin , sefalosporinler , kinolonlar , kloramfenikol , tetrasiklinler , sefuroksim ve trimetoprim gibi çoğu antibiyotiğe duyarlıdır .

Notlar ve referanslar

1. H. Barbier ve G. Ulmann, Bakteriyoloji: yeni bakteriyolojik ve klinik araştırma, profilaksi ve tedavi , Éditions J.-B. Baillière
2. E.Pilly 17 inci  Edition sayfa 342